иммунофлуоресцентный метод диагностики гриппа

ПИСЬМО РОСПОТРЕБНАДЗОРА ОТ 18.04.2006 N 0100/4463-06-32 "О МЕТОДИЧЕСКИХ РЕКОМЕНДАЦИЯХ ПО ВЫДЕЛЕНИЮ ВИРУСОВ ГРИППА И ДИАГНОСТИКИ ГРИППА И ОРВИ ИММУНОФЛУОРЕСЦЕНТНЫМ МЕТОДОМ" (ВМЕСТЕ С МЕТОДИЧЕСКИМИ РЕКОМЕНДАЦИЯМИ "БЫСТРАЯ ДИАГНОСТИКА ГРИППА И ДРУГИХ ОРВИ ИММУНОФЛУОРЕСЦЕНТНЫМ МЕТОДОМ" ОТ 18.04.2006 N 0100/4434-06-34, "ВЫДЕЛЕНИЕ ВИРУСОВ ГРИППА В КЛЕТОЧНЫХ КУЛЬТУРАХ И КУРИНЫХ ЭМБРИОНАХ И ИХ ИДЕНТИФИКАЦИЯ" ОТ 18.04.2006 N 0100/4430-06-34)

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека направляет для использования в работе разработанные специалистами ГУ НИИ гриппа РАМН и ГУ НИИ вирусологии им. Д.И.Ивановского РАМН методические рекомендации "Быстрая диагностика гриппа и других ОРВИ иммунофлуоресцентным методом" (от 18.04.06 N 0100/4434-06-34) и "Выделение вирусов гриппа в клеточных культурах и куриных эмбрионах и их идентификация" (от 18.04.06 N 0100/4430-06-34).

Иммунофлуоресцентный метод детекции вирусных антигенов является высоко чувствительным тестом быстрой дифференциальной диагностики респираторных вирусных инфекций. Он рекомендуется для обследования больных на ранних (первые 3 дня) стадиях инфекции в целях своевременного назначения специфической противовирусной терапии и проведения соответствующих профилактических мероприятий и широко используется в системе лабораторного надзора за гриппом в России и других странах мира. Результативность метода зависит от качества исследуемых клинических образцов, соблюдения условий их доставки в лабораторию и последующего процессинга, а так же от качества используемой иммунореагентики.

Предназначен для вирусологов, микробиологов, эпидемиологов. Его применение позволяет поставить диагноз в течение 1-2 часов после получения клинических материалов с охватом широкого круга наиболее значимых возбудителей острых респираторных вирусных инфекций (вирусы гриппа A различных субти

Источник

Методы лабораторной диагностики вирусных инфекций.

1.Быстрые (экспресс-методы) — прямое обнаружение вируса или его компонентов (антигенов, НК), включений непосредственно в клиническом материале.

культивировании вирусов в чувствительных биологических системах (клеточных культурах, курином эмбрионе, организмах лабораторных животных),

III. Серологический метод — определение противовирусных антител (оптимально — IgM) и/или определение динамики нарастания их титров за определенный период заболевания в парных сыворотках. Диагностически значимым считают нарастание титра антител в 4 и более раз.

Заболевания дыхательных путей, вызываемые вирусами, принято называть острыми респираторными вирусными инфекциями (ОРВИ). По частоте они занимают первое место среди всех заболеваний.

найпростейший способ заражения (воздушно-капельный путь), обусловливающий быстрое распространение возбудителя, которое при отсутствии иммунитета может стать причиной не только эпидемий, но и пандемий.

Парамиксовирусы (Paramyxoviridae) — это семейство включает четыре рода: Paramyxouirus — в него входят вирусы парагриппа человека (ВПГЧ) 1 и 3-го типов, болезни Ньюкасл, парагриппа птиц, Pneumovirus — респираторно-синцитиальный вирус (RS-вирус); Morbillivirus — вирус кори и Rubulavirus — вирус эпидемического паротита и парагриппа 2-го и 4-го серотипов.

5. Пикорнавирусы (Picornaviridae). Из этого семейства собственно возбудителями ОРЗ являются риновирусы (Rhinovirus, более 100 серовариантов), а также некоторые сероварианты вирусов Коксаки и ECHO (Enterovirus).

6. Респираторные аденовирусы (Adenoviridae), их геном представлен ДНК. Эти вирусы поражают эпителиальные клетки слизистой оболочки

дыхательных путей (главным образом верхних) и глаза, потому что мембраны этих клеток несут множество разнообразных рецепторов, с которыми взаимодейству

Источник

3. Методы микробиологической диагностики вирусных заболеваний

1.Вирусоскопический - обнаружение в исследуемом материале с помощью методов электронной микроскопии вирионов или с помощью светооптических микроскопов внутриклеточных включений.

4.Серологические методы - обнаружение противовирусных антител в сыворотке больного или реконвалесцента с помощью реакций нейтрализации вирусов, реакции связывания комплемента, реакции торможения гемагглютинации, реакций иммуноферментного метода (ИФМ), радиоиммунного метода, (РИМ), реакции пассивной гемагглютинации (РПГА), реакции гемагглютинации иммунного прилипания (комплекс АГ+АТ в присутствии комплемента адсорбируется на эритроцитах),реакций преципитации в агаре, имлунофлуоресцентного метода. В принципе эти реакции могут быть использованы и для обнаружения вирусных ан­тигенов.

5.Биологические методы - заражение чувствительных к данному вирусу лабораторных животных с целью воспроизведения заболевания или последующего выделения вируса.

§ I а)Цитопатическии эффект - дегенерация клеток, возникающая под действием размножающегося в культуре ткани вируса. Микроскопически цитопатическое действие, выражается в различных изменениях морфологии клеток, образовании гигантских многоядерных клеток (симпластов), пикнозе ядер и, наконец, в полной деструкции клеток. Макроскопически заметно слущивание клеток со стенок пробирки. Характер клеточной дегенерации зависит, в основном, от вида вируса.

Методика реакции. В пробирки о зараженной вирусом культурой ткани вносят 0,2 мл 0,4%-ной взвеси эритроцитов. Пробирки встряхивают и оставляют в наклонном положении. Длительность контакта эритроцитов с клетками зависит от температуры инкубация и вида вируса. Учет реакции производят под малым увеличением микроскопа после непродолжительного покачивания пробирки для отделения неадсорбированных эритроцитов от поверхности кл

Источник

ВИРУС ГРИППА А

Пациент Мерзликов Ярик Владимирович поступил в инфекционную больницу имени Г.Е. Сибирцева 25.02.2014 года (2 день болезни) с жалобами на повышение температуры тела до 40 С, снижение аппетита, слабость, вялость. С диагнозом острый тонзиллит. На основании данных анамнеза, объективных и параклинических данных был поставлен диагноз:

Вирус гриппа типа А вызвал крупнейшие пандемии в 1889, 1918 («испанка»), 1957, 1968, 1977 гг. Название болезни «грипп» было дано в XVIII в. французским врачом Ф. Бруссе (от фр. gripper -схватить). В Италии эта болезнь получила название «инфлюэнца» (итал. influenza di freddo - влияние холода). Грипп вызывают три вируса: А (открыт в 1933 г. В. Смитом, С. Эндрюсом и П. Лейдлоу), В (открыт в 1940 г. Т. Френсисом) и С (открыт в 1947 г. Р. Тэйлором).

Вирион имеет сферическую форму и диаметр 80-120 нм, его молекулярная масса 250 МД. Геном вируса представлен однонитевой фрагментированной (8 фрагментов) негативной РНК с общей м.м. 5 МД. Тип симметрии нуклеокапсида спиральный. Вирион имеет суперкапсид (мембрану), содержащий два гликопротеида - гемагглютинин и нейраминидазу, которые выступают над мембраной в виде различных шипов.

Нуклеокапсид вириона состоит из 8 фрагментов РНК и капсидных белков, образующих спиралевидный тяж. На З'-концах всех 8 фрагментов РНК имеются одинаковые последовательности из 12 нуклеотидов. 5'-концы каждого фрагмента также имеют одинаковые последовательности из 13 нуклеотидов. 5 - и З'-концы частично комплементарны друт другу. Это обстоятельство, очевидно, позволяет осуществлять регуляцию транскрипции и репликации фрагментов. Каждый из фрагментов транскрибируется и реплицируется самостоятельно. С каждым из них прочно связаны четыре капсидных белка: нуклеопротеид (NP), он выполняет структурную и регуляторную роль; белок РВ1 - транскриптаза; РВ2 - эндонуклеаза и РА - репликаза. Нукл

Источник

> stream x]K$qϯ6 ri ` D P6%"QU=3MJꨪxGftNӷ~c}R9=鷇?=7ǿ>|[p=OXdNO9+ z=>_AOKzN3:m?=rɱr s2K/~÷?S>IP~O ?~˃;R*wLw,pywrrvs6j-{NTfdNwRVw6/|fjqo5wc{WTŝ*m~÷;ץzNos92\C

MW0H{Op,pGU>U'lu[Ā:Zn#:Pd%E6̑ 6HޖJ7KƂ:UN{-E_ cI9"oN#H{0%A#* T1E KEs rr_tJ@O22GBO[Ԝ:Lj 0 4"kMGF8E0+*C`*(nX$y=) po݇n U?0[2< 3nIPswirwHW;D4|s%- n)rݒpGNkkԭr-%T[Jnɳk,{mRB庥/'/#.,.u||dz`:uKdxgUi\$8ܘn\$,bVk 42J$AiܹU tzxoJZ[J\pnIAV9J*Xj %͑6LU]k:[JnIAK=KcgY_d~'oJ}1ڗ}̶n)rR—uKl-m]O[ iT#{aݒQ!- GQ

1WEG rԀ0Q4\r㒋 z@! `~f)T&H-#v}޲ a k qg&III[Tve%lcGJ!Δs&]r6((YĄztCdkn,dc.!tnR0-eytDT 1JuynL\'X17(Comp^&e#Zmr&O(T}4qW34r ,hAURJQ/J\Dt4@:^$#jKnnmQgeù%]`Mh;+xuI.-EL= TIRLWRia>ne;#$-İc rAȭ+*Sz[ȺՄH˳sٙ%W"PZ崜ׅ:6 DkmPǤ,&P.OBP~4CQͬW\RB!&{fMذI r$=v(F I<¦LwCbYawBa2U&kH;GXhJ:0Fꪻ$T=+Xr_7C1Ke*A" llW]qըX90IL[J҆!b"֐͐ ;) ݥyDmu;ߔP&DFo!Vm׾5}`*N qF @G㿚iJ?o5YB*AAԔ`ϧ=|0n0LxT&w$nDZ%FO3\CpkQE0UmȘXuF C؜#DkF$ZrC3D9A0Vа> Hl4D=i{#} mK)v1ؑBq1yدmJwGo# ]>d{2w

P|]igvԇ;/;2+ϏsĚ6E+ÓEЬ%sE Ɛ(849AϲD5QW1NMܮ9J$11GP5֧YU `pyQ^D_6wyd\qfuG03*æyT * K(k.3} endstream endobj 42 0 obj

прививка от гриппа совигрипп противопоказания
Что ж, сегодня мы попытаемся разобраться, какие "Совигрипп" (вакцина) отзывы зарабатывает от врачей и пациентов. Данный препарат является крайне важным для современного человека. Ведь именно он помогает бороться с виру

, 6S9I)r̀3Y'vn҆c8MکO XM=^2o ͯ+eM񈔼] ڪVI ]h1<>EtwDgIc4X'?OYn;/B6:x8/TGAH|7xRaA0#ZT\JXhσA@Y@,ryDJKe-'˲

Источник

Вирусы гриппа и грипп

Вирусы гриппа

К семейству ортомиксовирусов (греч. orthos - правильный, туха - слизь) относятся вирусы гриппа типов А, В, С, которые так же, как и парамиксовирусы, обладают сродством к муцину. Вирусы гриппа А поражают человека и некоторые виды животных (лошади, свиньи и др.) и птиц. Вирусы гриппа типов В и С патогенны только для людей. Первый вирус гриппа человека был выделен от человека в 1933 г. В. Смитом, К. Эндрюсом и П. Лэйдоу (штамм WS) путем заражения белых хорьков. Позже этот вирус был отнесен к типу А. В 1940 г. Т. Френсис и Т. Меджилл открыли вирус гриппа типа В, а в 1949 г. Р. Тэйлор - вирус гриппа типа С.При классификации вирусов гриппа всегда испытывались определенные трудности, связанные с их антигенной изменчивостью. Вирусы гриппа подразделены на три типа А, В и С. К типу А отнесены несколько подтипов, отличающихся друг от друга своими антигенами - гемагглютинином и нейраминидазой. Согласно классификации ВОЗ (1980 г.), вирусы гриппа человека и животных типа А разделены на 13 антигенных подтипов по гемагглютинину (Н1-Н13) и на 10 - по нейраминидазе (N1-N10). Из них в состав вирусов гриппа человека типа А входит три гемагглютинина (HI, H2 и НЗ) и две нейраминидазы (N1 и N2).у вируса типа А в скобках указывается подтип гемагглютинина и нейраминидазы. Например, вирус гриппа А: Хабаровск/90/77 (H1N1).
лекарства от вирусного насморка у детей
Хорошо иметь свой блог! Пишешь все, что считаешь нужным. И никто не заставляет тебя писать о том, что «заказали». Только собственные мысли и суждения!

Итак, сезон кашля, соплей и болей в горле продолжает свое шествие

Структура и химический состав Вирус гриппа имеет сферическую форму, диаметром 80-120 нм. Реже встречаются нитевидные формы. Нуклеокапсид спиральной симметрии представляет собой рибонуклеопротеиновый (РНП) тяж, уложенный в виде двойной спирали, которая составляет сердцевину вириона. С ней связаны РНК-полимераза и эндонуклеазы (Р1 и РЗ). Сердцевина окружена мембраной, состоящей из белка М, который соединяет РНП с двойным липидным слоем внешней оболочки и шиловидными отростками, состоящими из гемагглютинина и нейрамин

Источник

Совершенствование методов выявления вируса гриппа птиц А/Н5N1 путем создания высокочувствительных диагностических систем тема диссертации и автореферата по ВАК 03.02.02, кандидат медицинских наук Левченко, Наталия Витальевна

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Левченко, Наталия Витальевна

Глава 1. Анализ эпидемиологической обстановки по гриппу птиц и современного состояния индикации его возбудителя (обзор литературы)

1.2. Иммунохимические и геннодиагностические системы для индикации вируса гриппа птиц в объектах окружающей среды и биологическом материале

1.3. Использование иммобилизованных носителей с целью совершенствования диагностических систем для выявления возбудителей инфекционных болезней ^ Собственные исследования

3.2. Приготовление иммунофлуоресцентных конъюгатов, используемых в количественном иммунофлуоресцентном анализе при выявлении вируса гриппа птиц А/Н5№ ^

3.3. Получение иммунопероксидазных конъюгатов, применяемых для иммуноферментного метода обнаружения вируса гриппа птиц А/Н5Ш, сконцентрированного на магнитных им-муносорбентах

Глава 4. Разработка метода селективного концентрирования вируса гриппа птиц из объектов окружающей среды с помощью магнитных иммуносорбентов и устройств для работы с ними

5.1. Количественный иммунофлуоресцентный анализ с использованием магнитных иммуносорбентов для обнаружения вируса гриппа птиц в объектах окружающей среды ^

5.2. Постановка иммуноферментного метода индикации вируса гриппа птиц с использованием в качестве твердой фазы магнитных иммуносорбентов

5.3. Использование магнитных иммуносорбентов для селективного концентрирования вируса гриппа птиц с последующим выявлением его методом полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией

Введение диссертации (часть автореферата) На тему "Совершенствование методов выявления в

Источник